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目的
探讨FGD6 (faciogenital dysplasia)基因对肝干细胞分化调控的作用。
方法选取FGD6基因干扰靶序列,使用AdEasy系统构建腺病毒载体,包装并扩增重组腺病毒载体pSES-FGD6-siRNA,感染HP14.5细胞。细胞免疫荧光检测FGD6蛋白在HP14.5细胞中的表达水平,实时荧光定量PCR检测FGD6、甲胎蛋白(AFP)及白蛋白(Alb)的mRNA水平,Western blot检测FGD6、AFP及Alb的蛋白表达水平。每组细胞均设置pSES-Ad-RFP腺病毒空载体感染进行对照。所有数据用均数±标准差(
±s)表示,采用单因素方差分析。
FGD6蛋白主要表达于HP14.5细胞胞核中。成功构建腺病毒载体pSES-FGD6-siRNA。下调FGD6基因在HP14.5细胞中的表达,可降低AFP的mRNA及蛋白的表达,而升高Alb的mRNA及蛋白的表达(P<0.01)。
结论抑制FGD6基因在HP14.5细胞中的表达,可使HP14.5细胞向肝细胞方向分化,因此,FGD6基因对肝干细胞分化调控可能起着重要作用。