【摘 要】
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目的制备稳定、特异的汉坦病毒核蛋白重组抗原和单克隆抗体.方法构建汉坦病毒(HTNV)-76118株核蛋白原核表达载体(pBV)220-S1.3和(pET)28a-S1.3,大肠埃希菌诱导表达.十二烷基
【机 构】
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陕西省疾病预防控制中心,西安交通大学,中国疾病预防控制中心病毒病研究所
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目的制备稳定、特异的汉坦病毒核蛋白重组抗原和单克隆抗体.方法构建汉坦病毒(HTNV)-76118株核蛋白原核表达载体(pBV)220-S1.3和(pET)28a-S1.3,大肠埃希菌诱导表达.十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western-blot分析显示,在48kD附近有目的蛋白表达,且有较好的抗原活性.用纯化的包涵体抗原免疫Balb/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经镍合氨基三乙酸(Ni-NAT)亲和纯化的核蛋白包被酶标板,进行ELISA筛选阳性克隆株,并建立细胞系,
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