探讨内源性孤啡肽（N/OFQ）是否通过Raf激酶抑制蛋白（RKIP）影响急性心肌缺血大鼠心律失常及心肌细胞膜表面β₁-肾上腺素能受体（β₁-AR）的表达。

①实验一：按随机数字表法将30只6周龄成年雄性SD大鼠分为假手术组〔Sham组，只开胸不结扎冠状动脉（冠脉）〕、心肌缺血模型组（结扎冠脉左前降支）、内源性N/OFQ拮抗剂UFP-101预处理组（UFP-101组，术前10 min经尾静脉注射1 mL/kg UFP-101），每组10只。记录各组大鼠术后15 min内心律失常结果；术后15 min取缺血心肌，采用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测磷酸化RKIP（p-RKIP）表达。②实验二：按随机数字表法将30只4周龄雄性SD大鼠分为UFP-101对照组、RKIP过表达组、RKIP拮抗组，每组10只。UFP-101对照组每日腹腔注射玉米油，其余两组注射RKIP上调剂香蜂草苷（Didymin），3组大鼠饲养4周后均行冠脉结扎，并均于术前10 min经尾静脉注射UFP-101。其中RKIP拮抗组术前2 h腹腔注射RKIP特异性拮抗剂洛法他丁（locostatin）。记录各组大鼠术后15 min内心律失常结果；Western Blot法检测术后15 min时心肌组织p-RKIP表达及心肌细胞膜表面β₁-AR表达。

①实验一：与Sham组比较，模型组和UFP-101组室性期前收缩（VEB）、室性心动过速（VT）、心室纤颤（VF）发生明显增多，心律失常评分明显升高；此外，与Sham组相比，模型组心肌组织p-RKIP表达升高，UFP-101组心肌组织p-RKIP表达下降。与模型组比较，UFP-101预处理可显著减少心律失常发生〔心律失常评分（分）：1.5（0.3，5.0）比4.0（2.0，5.0），P<0.05〕，心肌组织p-RKIP表达明显下降（p-RKIP/总RKIP：0.20±0.11比0.43±0.11，P<0.05）。说明拮抗N/OFQ能降低RKIP的磷酸化，减少心律失常发生。②实验二：与UFP-101对照组相比，RKIP过表达可显著增加心律失常事件发生，心肌细胞膜表面β₁-AR表达也明显增多；而拮抗RKIP过表达可使心律失常的发生有所缓解〔心律失常评分（分）：3.0（2.0，3.0）比4.0（2.0，5.0），P<0.05〕，并且明显减少心肌细胞膜表面β₁-AR的表达（β₁-AR/Na⁺-K⁺-ATP酶：0.88±0.09比1.02±0.08，均P<0.05），而总RKIP表达差异无统计学意义（总RKIP/GAPDH：5.40±0.21比5.36±0.19，P>0.05）。说明内源性N/OFQ通过RKIP影响大鼠缺血性心律失常和心肌细胞膜表面β₁-AR表达。

内源性N/OFQ可通过增加RKIP磷酸化表达来影响大鼠缺血心肌细胞膜表面β₁-AR的表达及心律失常。