灸法热刺激对脐静脉血管内皮细胞Caspase-3表达影响的研究

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目的研究灸法热刺激对人脐静脉血管内皮细胞中(HUVECs)Caspase-3基因和蛋白表达的影响,探讨灸法中温热刺激的抗凋亡及促凋亡的效应机制。方法原代HUVECs分为正常组(37℃)、适宜温热刺激组(40℃)和凋亡组(43℃),正常组不做任何处理,适宜温热刺激组置于40℃培养箱刺激30min,凋亡组置于43℃培养箱中刺激30min,每天2次,各组于第1天、2天、3天刺激结束4h后用MTT比色法检测HUVECs生长活力,第3天用QPCR和Western blot技术检测Caspase-3基因和蛋白表达。结果三组HUVECS生长活力逐渐增强,与第1天和第2天比差异均有统计学意义(P<0.001);每天适宜温热刺激组细胞生长活力较正常组增强,差异均有统计学意义(P<0.001或P<0.05);每天凋亡组细胞生长活力较正常组减弱,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.001)。第3天,与正常组比,适宜温热刺激组HUVECS内Caspase-3的基因和蛋白表达均降低(P<0.001),凋亡组HUVECS内Caspase-3的基因和蛋白表达均升高(P<0.05),凋亡组与适宜温热刺激组比,HUVECS内Caspase-3的基因和蛋白表达均升高(P<0.001)。结论灸法热刺激可调控HUVECs内的Caspase-3表达来调控细胞凋亡的过程,为全面认识灸法"活血化瘀"的生物学机制提供新的实验依据。
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