抗CD133单链抗体/白喉毒素DAB389融合蛋白的基因构建、表达、纯化及鉴定

来源 :中国实验诊断学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zhhaibin

【摘要】

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目的构建抗CD133单链抗体（scFV）/白喉毒素DAB389融合蛋白,在大肠杆菌里表达,并鉴定及纯化。方法采用PCR的方法,扩增融合基因DAB389-Linker-CD133（scFV）,并插入到原核表达载体pET2

【作者】

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程金章杨景朴仲炜王海涛赵胤陈俊俊王宗

【机构】

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吉林大学第二医院,吉林大学中日联谊医院,岳阳县人民医院

【出处】

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中国实验诊断学

【发表日期】

：

2018年9期

【关键词】

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CD133单链抗体白喉毒素融合蛋白

【基金项目】

：

吉林省科技厅基础处资助项目(201115081)

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目的构建抗CD133单链抗体（scFV）/白喉毒素DAB389融合蛋白,在大肠杆菌里表达,并鉴定及纯化。方法采用PCR的方法,扩增融合基因DAB389-Linker-CD133（scFV）,并插入到原核表达载体pET28a中,构建了重组表达载体pET28a-DAB389-CD133,融合蛋白在BL21（DE3）中表达,表达产物经SDS-PAGE鉴定,通过Ni柱纯化目的蛋白,获得了纯度达95%的DAB389-Linker--CD133（scFV）融合蛋白。Western blot鉴定蛋白活性。流式细胞仪检测

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