【摘 要】
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目的:建立快速、准确测定人体尿液中香草扁桃酸(VMA)、高香草酸(HVA)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)的高效液相色谱-电化学法,为实施无创性采样运动训练监控研究提供新的实验室检测
【机 构】
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国家体育总局运动医学研究所,北京体育大学研究生院,西安工业大学体育系,武汉体育学院研究生部,上海体育学院研究生处
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目的:建立快速、准确测定人体尿液中香草扁桃酸(VMA)、高香草酸(HVA)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)的高效液相色谱-电化学法,为实施无创性采样运动训练监控研究提供新的实验室检测手段.方法:采用ISO-3100高效液相色谱仪系统,BM钛系统泵、WPS 3000自动进样器、WAX-1阴离子交换色谱柱(3 μm,3×150 mm),5011A双通道库仑电化学检测器；流动相由20 mmol/L磷酸缓冲盐配制成盐溶液并调节pH值=5,然后与乙腈分别按照75∶20(v/v)和80∶25 (v/v)配制成流动相A和流动相B,超声20 min后使用.流速为0.4 ml/min,进样量为5μl.检测器采用E1=100 mV和E2=500 mV两种电势条件.采用以上色谱条件分别测定标准品和成年人24 h尿样的VMA、HVA、5-HIAA含量,并进行统计和分析.结果:VMA、HVA、5-HIAA的线性关系分别为v=55.387x-0.2327(r=0.9998),y=55.31x+0.3247(r=0.9996),y=59.752x-0.1938(r=0.9987);最低检测限分别为5 ng/ml、5 ng/ml和7 ng/ml;批内变异系数(CV)分别为2.7％、2.4％、1.6％,批间变异系数分别为3.2％、3.1％、4.1％；所测成年人24h尿的VMA、HVA和5-HIAA含量分别为(1.65±0.08)mg/day、(2.67±0.24)mg/day、(1.79±0.13)mg/day,均分别符合正常成年人24 h尿中VMA、HVA、5-HIAA的水平.结论:本研究所采用的新型WAX阴离子交换色谱柱特异性好,对阴离子化合物的分离效果显著.本方法测定结果良好,线性关系、精密度以及检测限均满足定量要求,值得在研究中推广使用.
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