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采用正交设计的方法,对刚竹ISSR-PCR反应体系中的5因素(Taq酶、Mg^2+、dNTP、模板DNA和引物)4个水平进行优化筛选,建立了刚竹ISSR-PCR反应的最佳体系,即20μL反应体系中含有1×buffer、Taq酶1.5U、Mg^2+2.5mmol·L^-1、模板DNA80ng、dNTP0.15mmol.L^-1、引物0.4μmol·L^-1;通过梯度PCR试验筛选得到相应引物的最佳退火温度。