【摘 要】
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目的:探讨归芪定年方(GDP)对D-半乳糖(D-gal)诱导致衰型小鼠肾系膜细胞中Janus酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)/信号转导与转录激活因子(STAT)信号通路相关分子表达水平的影响.方法:以D-gal 10 g·L-1诱导复制小鼠肾系膜细胞衰老模型,经GDP 40 mg·L-1水煎剂处理3d后,衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色测定细胞衰老状态,流式细胞术检测细胞周期,细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测细胞存活率,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肿瘤坏死因
【机 构】
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甘肃省肿瘤医院,兰州730000;甘肃中医药大学,兰州730000;甘肃省高校重大疾病分子医学与中医药防治研究重点实验室,兰州730000;甘肃中医药大学,兰州730000
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目的:探讨归芪定年方(GDP)对D-半乳糖(D-gal)诱导致衰型小鼠肾系膜细胞中Janus酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)/信号转导与转录激活因子(STAT)信号通路相关分子表达水平的影响.方法:以D-gal 10 g·L-1诱导复制小鼠肾系膜细胞衰老模型,经GDP 40 mg·L-1水煎剂处理3d后,衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色测定细胞衰老状态,流式细胞术检测细胞周期,细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测细胞存活率,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6),核转录因子-κB(NF-κB)和白细胞介素-1α(IL-1α) mRNA表达水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)测定细胞中JAK2/STAT信号通路相关分子STAT1,磷酸化STAT1 (p-STAT1),STAT3,p-STAT3蛋白水平.结果:CCK-8结果显示GDP最佳药物质量浓度为40 mg· L-1.与空白组比较,模型组SA-β-gal细胞阳性率显著升高(P＜0.01),G0/G1期细胞百分数明显升高(P＜0.05),G2/M期和S期细胞百分数显著降低(P＜0.01),TNF-α,IL-6,NF-κB和IL-1α mRNA表达水平显著上调(P＜0.01),STAT1,p-STAT1,STAT3和p-STAT3蛋白水平显著升高(P＜0.01);与模型组比较,模型+GDP组SA-β-gal细胞阳性率明显降低(P＜0.05),G0/G1期百分数明显降低(P＜0.05),G2/M期和S期细胞百分数显著增加(P＜0.01),TNF-α,IL-6,NF-κB和IL-1α mRNA表达水平明显下调(P＜0.05),STAT1,p-STAT1,STAT3和p-STAT3蛋白水平明显降低(P＜0.05).结论:GDP可延缓小鼠肾系膜细胞衰老的进程,其作用机制可能与下调细胞JAK2/STAT通路相关因子的表达水平相关.
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