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目的用饲养层分离胚胎干细胞集落。方法用胚龄为13～14d的小鼠胚胎分离原代成纤维细胞，制成饲养层，用于囊胚的培养。结果小鼠原代胚胎成纤维细胞(PMEF)贴壁能力较好，增殖快，易铺层。囊胚和内细胞团(ICM)在饲养层上贴壁生长良好，当培养4～5 d时，其增殖率为16／28(57％)。在ICM离散48h后，各种胚胎干细胞(ES)集落开始出现。此种集落经碱性磷酸酶染色成阳性。结论用饲养层分离胚胎干细胞获得初步成功。