Survivin基因调节人脑胶质瘤细胞侵袭与迁移机制的探讨

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目的:检测并研究Survivin基因对U251及U87神经胶质瘤细胞侵袭及迁移的影响,为胶质瘤的基因治疗提供理论和实验依据.方法:(1)通过划痕实验及Transwell迁移实验检测细胞在干扰及过表达Survivin胶质瘤细胞迁移的变化;(2)通过Transwell侵袭实验检测细胞在干扰及过表达Survivin胶质瘤细胞侵袭能力的变化;(3)通过Westernblot和免疫荧光实验检测细胞在干扰Survivin 48h后N-cadherin表达及定位的变化;(4)通过明胶酶谱实验检测在干扰及过表达Survivin 48h后细胞分泌MMP的变化.结果:(1)针对Survivin特异性的三条siRNAoligo,干扰效率达70%-80%;过表达后转染率在80%左右;(2)划痕实验Transwell实验(不铺胶)证实转染siRNAoligo和过表达Survivin后细胞迁移数目明显低于对照组(P<0.01),Transwell迁移实验证实转染siRNAoligo和过表达Survivin后穿过滤膜的细胞数目明显低于对照组(P<0.01);(3) Transwell侵袭实验证实转染siRNAoligo和过表达Survivin后细胞侵袭数目明显低于对照组(P<0.01);(4)明胶酶谱证实转染siRNAoligo后细胞分泌基质金属酶低于对照组,而过表达Survivin后高于对照组;明胶酶谱实验显示:与对照组相比,siRNAoligo组MMP2的活性明显降低(P<0.05).结论:(1) Survivin基因调节神经胶质瘤细胞的迁移能力;(2) Survivin基因通过调节MMP2的分泌来影响神经胶质瘤细胞的侵袭能力.
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