【摘 要】
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以大鼠染色体DNA为模板,PCR分别扩增胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)基因外显子2编码区和外显子3编码区,并使外显子2编码区的3′端与外显子3编码区的5′端有相同的40个碱基.采用
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以大鼠染色体DNA为模板,PCR分别扩增胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)基因外显子2编码区和外显子3编码区,并使外显子2编码区的3′端与外显子3编码区的5′端有相同的40个碱基.采用外显子拼接法,以两种扩增产物为模板再次进行PCR,得到210bp的大鼠IGF-Ⅰ基因全编码序列.将此序列克隆入pUC18质粒进一步构建表达型重组质粒pGEX-IGF-Ⅰ,并在大肠杆菌DH5α中进行诱导表达.表达产物经SDS-PAGE分析及Western blot检测,并经体外实验证明其具有刺激细胞增殖的生物活性.
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