【摘 要】
：
目的构建人胚胎干细胞cDNA文库,为筛查疾病抗原基因奠定基础。方法培养和收集人胚胎干细胞克隆,提取胚胎干细胞总RNA,分离纯化mRNA,利用mRNA作模板反转录合成双链cDNA,双链DN
【机 构】
：
广西医科大学生物化学与分子生物学教研室; Cancer Research UK Immunology Group Paterson Institute for Cancer Research
【基金项目】
：
广西自然科学基金项目(桂科自0728121)
论文部分内容阅读
目的构建人胚胎干细胞cDNA文库,为筛查疾病抗原基因奠定基础。方法培养和收集人胚胎干细胞克隆,提取胚胎干细胞总RNA,分离纯化mRNA,利用mRNA作模板反转录合成双链cDNA,双链DNA经pfu-DNA聚合酶将链末端补平,与EcoRⅠ接头连接,XhoⅠ酶切消化产生粘端。用Sepharose CL2B柱分离纯化及除去小分子cDNA片段,与Uni-ZAP XR噬菌体连接,体外转化XL1-blue MRF’菌,建成cDNA文库并计算重组效率。对cDNA文库进行扩增,测定扩增文库的滴度。阳性重组子用EcoRⅠ+XhoⅠ双酶切鉴定插入片段的大小。结果构建成含1.2×106重组子的人胚胎干细胞cDNA文库,重组子插入外源DNA片段长度不小于1000kb。结论已成功构建人胚胎干细胞cDNA文库,适合用于筛选目的基因克隆。
其他文献
基本的蒙代尔-弗莱明(MF)模型的假设条件比较严格,也比较脱离实际,但是只要在基本模型的基础上加入现实的假设条件,对MF模型进行扩展,就可以用它来解决实际的问题.目前,对MF
加强保障房建设不但能平抑高房价，降低金融风险，推动城镇化进程，而且可以优化资源配置，扩大内需与就业，维护经济稳定增长，同时也能增加民众福祉，缩小贫富差距，利于社会和谐发展。然而
文章采用体外细胞培养和放射免疫测定(RIA)等方法,研究了褪黑素(MLT)对季节性繁殖的蒙古母羊垂体细胞分泌促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)和促乳素(PRL)的作用.结果表明:当单独
行政公益诉讼调查权,是检察机关履行公益诉讼职责的重要保障。在行政公益诉讼中,检察机关并不是普通的原告,而是以法律监督机关的身份,与法院共同处理公益被侵害的问题。在此
以武汉职业技术学院在校生为对象进行抽样调查,对该校通识教育的状况和大学生人文素质现状进行双变量相关分析,发现通识课建设与学生人文素质之间存在一些可循规律,为此,提出
5052铝合金因具有比强度高、塑性及耐腐蚀性高、焊接性良好等优点,广泛应用于航空航天、轨道交通等领域。文中针对1.5mm厚5052铝合金进行激光点焊试验,研究光束倾角对焊点成
摇枕是薄壁复杂构件,是转向架关键部件之一,其有限元仿真准确性对于疲劳寿命分析具有很大的影响。文章以转K6摇枕为对象,基于摇枕静载试验和实测结果,分别构建了多个不同接触
分析沈阳体育学院课程建设的现状和课程建设中存在的问题。并对存在问题的原因进行分析，确立课程改革的概念及沈阳体育学院课程改革的切入点，最后提出沈阳体育学院课程改革的具
引用参考文献是反映论文的科学性及学术水平的重要依据,也是作者尊重他人研究成果的体现,并可向读者进一步提供有关信息。作者引用的参考文献应限于其亲自阅读过的、主要的、
由于学生权利的不可侵犯性与高校自主管理的教育规律，高校管理权与学生权利的冲突从高校设立起就开始存在。近几年，这两种权利的冲突日趋激烈。文章从高校管理与学生权利的现状