【摘 要】
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目的 分离、培养并鉴定尿源干细胞(USCs),评估慢病毒载体介导胰岛素样生长因子1(IGF-1)基因感染USCs的安全性及有效性,探究IGF-1对USCs增殖、迁移能力的影响,为后续USCs-基因联合移植治疗勃起功能障碍(ED)动物模型提供可靠的体外实验证据.方法 采用差速贴壁法分离培养原代USCs并鉴定.慢病毒载体介导IGF-1转染USCs,采用Western blot和PCR检测IGF-1表达情况,采用CCK-8实验、Transwell小室分析IGF-1对USCs的增殖及迁移能力影响.结果 成功分离人
【机 构】
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华南理工大学医学院附属广东省人民医院(广东省医学科学院)泌尿外科,广州510080;国家卫生健康委员会男性生殖与遗传重点实验室,广东省生殖科学研究所(广东省生殖医院),广州510600
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目的 分离、培养并鉴定尿源干细胞(USCs),评估慢病毒载体介导胰岛素样生长因子1(IGF-1)基因感染USCs的安全性及有效性,探究IGF-1对USCs增殖、迁移能力的影响,为后续USCs-基因联合移植治疗勃起功能障碍(ED)动物模型提供可靠的体外实验证据.方法 采用差速贴壁法分离培养原代USCs并鉴定.慢病毒载体介导IGF-1转染USCs,采用Western blot和PCR检测IGF-1表达情况,采用CCK-8实验、Transwell小室分析IGF-1对USCs的增殖及迁移能力影响.结果 成功分离人USCs并传代培养.成骨、成脂分化后,茜素红S、油红O染色阳性;流式细胞技术检测结果显示,USCs表达间充质干细胞标志物CD44、CD73、CD90、CD146,不表达造血干细胞标志物CD31、CD45.重组USCs能稳定持续高表达IGF-1蛋白;重组USCs增殖、迁移能力显著高于对照组USCs(P0.05).结论 USCs取材简便且无创,分化和增殖能力强;慢病毒载体介导IGF-1转染USCs安全有效,IGF-1能够促进USCs增殖、迁移,为后续USCs-基因联合移植治疗ED奠定基础.
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