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探讨微RNA-224(miR-224)在人胆管癌(CC)细胞凋亡与增殖中的调控机制以及在胆管癌细胞中是否存在miR-224-HOXD10-PAK4传导通路。
方法利用实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术测定CC和癌旁正常组织中miR-224的表达量。胆管癌QBC939细胞株病毒转染分为两组：细胞转染阴性对照组(NC组)，细胞转染目的基因miR-224-down组(DOWN组)。记录NC组和DOWN组中QBC939细胞凋亡率及细胞克隆形成数。利用RT-PCR和蛋白印迹(Western blotting)检测NC组和DOWN组QBC939细胞中miR-224、API5、PAK4、HOXD10的表达。
结果(1) CC组织中miR-224的表达显著高于癌旁正常组织(P<0.05)。(2)DOWN组QBC939细胞的miR-224表达显著低于NC组。DOWN组QBC939细胞凋亡率显著高于NC组。DOWN组QBC939细胞的克隆形成率显著低于NC组。(3)RT-PCR和Western blotting实验证实DOWN组QBC939细胞中API5、HOXD10的表达明显高于NC组。(4)DOWN组QBC939细胞中PAK4的表达显著低于NC组。
结论miR-224有体外抗QBC939细胞凋亡及促进QBC939细胞增殖的作用，是细胞增殖的重要调节因子。QBC939细胞中存在miR-224-HOXD10-PAK4信号传导通路。