论文部分内容阅读
目的 克隆、表达小鼠TLR3并进行功能鉴定. 方法用聚合酶链反应技术扩增得到mTLR3 cDNA,经酶切后将其克隆到真核表达质粒pBabe-puro,转染L929细胞,细胞裂解液经免疫沉淀后,SDS-PAGE和免疫印迹检测蛋白表达,并用免疫组化技术观察polyI∶C刺激、经TLR3介导的对IRF3的激活作用. 结果克隆得到mTLR3 cDNA,构建重组体后转染细胞后表达的蛋白质相对分子量与预计相符,并能识别双链RNA类似物polyI∶C,诱导IRF3核转位. 结论表达的小鼠TLR3具有生物学活性,为进一步研究TLR3介导的信号通路及其在抗病毒免疫中的作用打下基础。