δ-氨基-γ-酮戊酸合成酶（ALAS）基因的克隆与原核表达

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【摘要】

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为获得 ALAS的重组表达蛋白,以人肝脏组织 cDNA为模板,通过 PCR扩增得到 ALAS全长片段并测序,成功构建了 pET30a（＋）—ALAS融合表达载体并转化大肠杆菌 Rosetta （DE）.IPTG诱导融合

【作者】

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赵艳琼刘峰王美玲李存保

【机构】

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内蒙古医科大学护理学院,内蒙古第四医院内六科,内蒙古医科大学药学院,内蒙古医科大学基础医学院

【出处】

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内蒙古师范大学学报：自然科学汉文版

【发表日期】

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2014年6期

【关键词】

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δ-氨基-γ-酮戊酸合成酶重组蛋白基因工程 RT-PCR 大肠杆菌 ALAS recombinant protein genetic engineeri

【基金项目】

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内蒙古自然科学基金资助项目（2014MS08110）

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为获得 ALAS的重组表达蛋白,以人肝脏组织 cDNA为模板,通过 PCR扩增得到 ALAS全长片段并测序,成功构建了 pET30a（＋）—ALAS融合表达载体并转化大肠杆菌 Rosetta （DE）.IPTG诱导融合蛋白表达. SDS变性凝胶电泳结果显示,融合蛋白的分子量约70 kDa,并且在上清液中有少量表达.经镍柱一步纯化得到His6—ALAS融合蛋白.

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