重组腺相关病毒介导内皮抑素的表达及体外活性研究

来源 :第一军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：JohnStorm

【摘要】

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目的构建携带人内皮抑素基因的重组腺相关病毒rAAV-hEndo,介导其体外表达并检测其生物活性.方法采用无需包装辅助病毒的双质粒共转染方法制备rAAV-hEndo,测定其滴度及感染效

【作者】

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李晓华李湘平李刚刘雄

【机构】

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南方医科大学南方医院耳鼻喉科

【出处】

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第一军医大学学报

【发表日期】

：

2005年6期

【关键词】

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目的构建携带人内皮抑素基因的重组腺相关病毒rAAV-hEndo,介导其体外表达并检测其生物活性.方法采用无需包装辅助病毒的双质粒共转染方法制备rAAV-hEndo,测定其滴度及感染效率.免疫荧光染色检测内皮抑素蛋白在体外感染细胞中的表达,并通过MTT法、细胞周期检测及TUNEL法检测细胞凋亡指数,观察其对人脐静脉内皮细胞ECV304的影响.结果所制备的重组腺相关病毒滴度为2×1012vg/ml,感染效率达98%.免疫荧光染色显示内皮抑素蛋白主要表达于细胞胞质.rAAV-hEndo感染细胞培养上清

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