【摘 要】
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目的利用定向结晶技术制备具有仿生取向微孔结构的丝素蛋白支架,探讨其作为软骨支架的可行性。方法以丝素蛋白为原料,采用定向结晶技术制成具有仿生取向微孔结构的支架,扫描
【机 构】
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天津医科大学,天津市天津医院微创脊柱外科,天津市中西医结合骨科研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31470937,31300798,81272046);天津市卫生局科技基金项目(2013KR16,2012KY24)
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目的利用定向结晶技术制备具有仿生取向微孔结构的丝素蛋白支架,探讨其作为软骨支架的可行性。方法以丝素蛋白为原料,采用定向结晶技术制成具有仿生取向微孔结构的支架,扫描电镜观察支架结构,测量支架的孔径、孔隙率和力学性能。从兔颈背部分离出脂肪干细胞,培养后获取第3代细胞,接种到支架上。CCK8检测支架上细胞增殖情况;HE染色和扫描电镜观察细胞在支架上的黏附能力;LIVE/DEAD染色观察支架上的细胞活性。结果扫描电镜显示,支架纵切面可见平行排列的微管样结构,具有较为统一的方向性,横切面可见椭圆或圆形孔隙结构,横截面微孔结构的平均孔径为(112.43±12.65)μm,孔隙率高达(90.25±2.05)%,支架压缩弹性模量为(52.48±5.78)k Pa;复合脂肪干细胞培养,HE染色和扫描电镜可见细胞均匀黏附在支架表面及孔隙内,分泌大量沿微孔结构取向分布的细胞外基质;CCK8检测结果显示细胞在支架上增殖良好;LIVE/DEAD染色显示细胞保持良好的活性,未见死细胞。结论取向性丝素蛋白支架具有均匀的仿生取向微孔结构,具有合适的孔径、孔隙率和生物相容性,力学强度良好,可作为软骨组织工程的支架载体。
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