【摘 要】
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用Stratagene技术构建了吉富品系尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus, GIFT strain)肝cDNA文库.首先用TRIZOL法提取肝总RNA,经琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度检测,表明总RNA纯
【机 构】
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上海水产大学农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室
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用Stratagene技术构建了吉富品系尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus, GIFT strain)肝cDNA文库.首先用TRIZOL法提取肝总RNA,经琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度检测,表明总RNA纯度高且完整性良好.然后分离纯化mRNA,合成双链cDNA之后,加EcoRⅠ接头、EcoRⅠ末端磷酸化、XhoⅠ消化,并用葡聚糖凝胶柱层析分级收集cDNA样品,得到300 mg cDNA,符合建库要求.双链cDNA与Uni-ZAP XR Vector连接后,用GigapackⅢGold
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