人MDC1基因shRNA反转录病毒载体的构建及鉴定

来源 :解放军医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：nihaoalinlin

【摘要】

：

目的建立反转录病毒介导的MDC1基因RNA干扰表达体系并观察其在宫颈癌细胞（HeLa）中对MDC1表达的影响。方法将人MDC1基因的RNA干扰双链DNA片段重组到反转录病毒质粒pSilencer5.1-

【作者】

：

袁成福黄秀凝程莉卜友泉刘涛刘革力易发平宋方洲

【机构】

：

重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心,湖北民族学院医学院生物化学教研室

【出处】

：

解放军医学杂志

【发表日期】

：

2009年4期

【关键词】

：

psiRNA-MDC1反转录病毒载体 MDC1基因宫颈癌 psiRNA-MDC1 retroviral vector MDC1 gene cervical

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目（30872758）,教育部博士点基金资助项目（20070631011）,重庆市科委自然科学基金资助项目（2007BE5302）

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目的建立反转录病毒介导的MDC1基因RNA干扰表达体系并观察其在宫颈癌细胞（HeLa）中对MDC1表达的影响。方法将人MDC1基因的RNA干扰双链DNA片段重组到反转录病毒质粒pSilencer5.1-H1Retro中,构建携带人MDC1基因的RNA干扰反转录病毒载体psiRNA-MDC1。经PT67细胞包装后,产生的重组反转录病毒感染宫颈癌细胞株HeLa细胞,并用嘌呤霉素筛选稳定的细胞克隆。采用RT-PCR和Western blotting检测细胞中MDC1mRNA和蛋白表达的变化。结果重组psiRNA

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