【摘 要】
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建立人类白细胞抗原(HLA)-Ⅱ型抗原4个基因位点DRB1、DQA1、DQB1、DPB1的聚合酶链式反应-单-链构象多态分析(PCR-SSCP)配型方法.实验分三部分:1.通过预实验确定使用PCR-SSCP
【机 构】
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北京市心肺血管疾病研究所,中国医学科学院基础医学研究所
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建立人类白细胞抗原(HLA)-Ⅱ型抗原4个基因位点DRB1、DQA1、DQB1、DPB1的聚合酶链式反应-单-链构象多态分析(PCR-SSCP)配型方法.实验分三部分:1.通过预实验确定使用PCR-SSCP检测HLA-DRB1、DA1、DQB1、DPB1 4个位点的实验条件;2.使用以上方法对1例拟行心脏移植的患者在127例健康人群中进行基因位点的检测配型;3.对配型一致及不一致的供体和受体,进行体外混合淋巴细胞培养(MLC),以检验这种基因配型方法的可靠性.通过PCR-SSCP的检测配型,在127例供体中,2例DRB1位点、2例DQA1位点、3例DQB1位点、2例DPB1位点与受体相一致.体外MLC证实与受体不一致的供、受体MLC中,受体淋巴细胞呈高度增殖反应;而与受体某一位点一致的供体,其MLC中受体淋巴细胞增殖反应明显降低(P＜0.01).PCR-SSCP是一种快速、准确的HLA-Ⅱ类抗原基因位点检测配型的方法.
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