巴戟天ISSR体系的建立与优化

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【摘要】

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以巴戟天叶片提取的基因组DNA为材料，对影响ISSR-PCR扩增效果的一些因素，如dNTPs浓度、Mg2＋浓度、TaqDNA聚合酶用量、引物用量、模板DNA用量以及退火温度等指标进行筛选和优化，确

【作者】

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刘颖嘉黄宇荣俊冬何天友胡迪科郑郁善

【机构】

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福建农林大学工业原料林研究所

【出处】

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种子

【发表日期】

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2011年9期

【关键词】

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巴戟天 ISSR—PCR 体系优化 Morinda officinalis How. ISSR-PCR System optimization

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以巴戟天叶片提取的基因组DNA为材料，对影响ISSR-PCR扩增效果的一些因素，如dNTPs浓度、Mg2＋浓度、TaqDNA聚合酶用量、引物用量、模板DNA用量以及退火温度等指标进行筛选和优化，确立了可用于巴戟天的ISSR—PCR分析最适宜的PCR反应条件，即20ul PCR反应体积中含0．2mmol／LdNTPs，2．0mmol／L Mg2＋，1．0UTaqDNA聚合酶，0．5umol／L引物，50ng模板DNA。PCR扩增程序：94oC预变性5min，94℃变性30s，53．4℃退火45s，72℃延伸

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