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采用PEG介导的原生质体转化方法，研究了将含有潮霉素抗性基因的质粒pMP．Hygro转入红曲菌9903A的影响因素。实验结果表明，原生质体转化最佳条件为：1．0mol／L的山梨醇为渗透压稳定剂；以含有50mmol／L的Ca^2＋和最终质量分数为40％的PEG4000为转化介质；最佳原生质体浓度和载体DNA用量分别为1×10^8个／mL、1μg／100μL原生质体；原生质体再生培养基采用不含无机盐的培养基，再生方式采用原生质体液涂布单层再生培基平板法。得到的平均DNA转化率可达160个／μg DN