【摘 要】
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以IL-8免疫的BALB/C小鼠脾细胞与Sp2/0或653小鼠骨髓瘤细胞融合构建了淋巴细胞杂交瘤克隆I8-S2和I8-63。ELISA叠加试验(ELISA Additivity Test)表明这两杂交瘤克隆分泌的单抗
【机 构】
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中国科学院上海细胞生物学研究所,Yes Biotech Laboratory Ltd., Mississauga, Canada L4Z 1N8 上海 200031
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以IL-8免疫的BALB/C小鼠脾细胞与Sp2/0或653小鼠骨髓瘤细胞融合构建了淋巴细胞杂交瘤克隆I8-S2和I8-63。ELISA叠加试验(ELISA Additivity Test)表明这两杂交瘤克隆分泌的单抗分别识别IL-8分子的不同表位。IL-8能激活人颗粒细胞,引起细胞内Ca~(2+)浓度([Ca~(2+)]_i)上升。通过流式细胞仪分析[Ca~(2+)]_i的变化,发现两个克隆单抗对IL8激活细胞的活力具有不同的中和作用。克隆I8-S2具有很强的中和作用,而克隆18-63则不然。上述结果提示IL-8的激活细胞活力局限于该分子的某表位。
Lymphocyte hybridoma clones I8-S2 and I8-63 were constructed by fusing BALB / C mouse splenocytes immunized with IL-8 with Sp2 / 0 or 653 mouse myeloma cells. ELISA Additivity Test showed that the monoclonal antibodies secreted by both hybridoma clones recognized different epitopes of the IL-8 molecule, respectively. IL-8 can activate human granulosa cells, causing intracellular Ca 2+ concentration ([Ca 2+] i) to rise. The change of [Ca ~ (2 +)] _i was analyzed by flow cytometry and it was found that the two clonal McAbs had different neutralization effects on the viability of IL8-activated cells. Clone I8-S2 had a strong neutralization, whereas clone 18-63 did not. The above results suggest that the viability of IL-8-activated cells is limited to a certain epitope of the molecule.
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