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建立了高效液相色谱法测定生物素的有关物质.采用C18色谱柱,以16.7 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 2.9)∶甲醇为流动相,梯度洗脱,检测波长210 nm.在上述色谱条件下生物素与各中间体及降解产物均能有效分离,4种己知有关物质在1~20 μg/ml范围内线性关系良好,平均回收率为93.3%~99.3%,最低检测限分别为0.365、0.280、0.255和0.480 μg/ml.