Fe(Ⅱ)/2-酮戊二酸依赖型双加氧酶重组大肠杆菌全细胞催化合成4-羟基异亮氨酸

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【摘要】

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以L-异亮氨酸(L-ILe)为底物,以异源表达Fe(Ⅱ)/2-酮戊二酸依赖型双加氧酶的重组大肠杆菌BL21/pET28a-ido全细胞作为催化剂,催化合成4-羟基异亮氨酸(4-HIL).基于重组异亮氨酸

【作者】

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张文丽聂尧景晓冉徐岩

【机构】

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江南大学生物工程学院

【出处】

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高等学校化学学报

【发表日期】

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2019年6期

【关键词】

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L-异亮氨酸全细胞催化 4-羟基异亮氨酸双加氧酶过程调控 L-Isoleucine Whole cell catalysis 4-Hydroxyisole

【基金项目】

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国家自然科学基金(批准号: 21336009, 21676120),江苏省六大人才高峰计划项目(批准号: 2015-NY-007),江苏高校优势学科建设工程项目资助.

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以L-异亮氨酸(L-ILe)为底物,以异源表达Fe(Ⅱ)/2-酮戊二酸依赖型双加氧酶的重组大肠杆菌BL21/pET28a-ido全细胞作为催化剂,催化合成4-羟基异亮氨酸(4-HIL).基于重组异亮氨酸双加氧酶(IDO)催化异亮氨酸羟基化的性质和条件,在摇瓶水平上对辅因子亚铁离子、α-酮戊二酸(α-KG)及底物浓度进行了单因素优化.获得的最佳反应条件为2g/L FeSO4·7H2O,底物与α-KG摩尔比为1∶1,该条件下反应8h可生成190mmol/L4-HIL.结合摇瓶水平的最优条件,在反应器

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