我国鸡传染性支气管炎病毒地方性流行毒株S1基因的RT-PCR扩增及其克隆与鉴定

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采用RT-PCR方法,以IBV S1全基因特异性引物分别从我国华东(HD)、华北(HB)、华中(HZ)、华南(HN)、西北(XB)及东北(DB)等地的IBV流行株基因组中扩增出预期的1.7 kb左右的DNA片段.PCR产物的HaeIII酶切分析及其与英国IBV S1全基因核酸探针的分子杂交证实所获6个IBV流行株的PCR产物为IBV S1基因.将此6个毒株的S1基因PCR产物分别进行5和3端的BamHI和HindIII酶切识别位点的分子修饰之后插入到克隆质粒pUC18的BamHI/HindIII位点,在大肠杆菌中实现了目的基因的分子克隆.S1基因的RFLP分析表明我国IBV已有分子水平的变异.
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