rAAV2/1-Acrp30病毒的纯化、扩增与活性检测

来源 :中华微生物学和免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：asdf1aasdf

【摘要】

：

目的将大鼠脂联素基因（Acrp30）克隆到腺相关病毒（AAV）载体中，经包装、纯化、扩增后获得rAAV2／1-Acrp30病毒，并进行活性检测。方法筛选阳性克隆获得pSNAV2．0-Acrp30，EcoRⅠ／SalⅠ双酶切

【作者】

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李强翔钟惠菊欧阳石谭华清王敏龙国祥李果

【机构】

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中南大学湘雅医院,湖南省娄底市中心医院,中南大学行政管理学院,解放军458医院

【出处】

：

中华微生物学和免疫学杂志

【发表日期】

：

2009年7期

【关键词】

：

rAAV2/1-Acrp30 扩增活性检测 rAAV2/1-Acrp30 Amplification Activity detection

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目的将大鼠脂联素基因（Acrp30）克隆到腺相关病毒（AAV）载体中，经包装、纯化、扩增后获得rAAV2／1-Acrp30病毒，并进行活性检测。方法筛选阳性克隆获得pSNAV2．0-Acrp30，EcoRⅠ／SalⅠ双酶切鉴定，并行测序。转染BHK21细胞，G418筛选培养，获得抗药克隆细胞株。HSV1-rc／△UL2感染，包装此细胞株并收获病毒载体rAAV2／1-Acrp30。行DNA斑点杂交法测定病毒滴度，SDS-PAGE分析判断病毒纯度，Western blot法检测目的蛋白脂联素在HEK293细胞

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