【摘 要】
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目的:探讨促炎症消退介质maresin-1(MaR1)对巨噬细胞自噬的影响及其机制.方法:培养小鼠骨髓来源巨噬细胞,给予MaR1后,用激光扫描共聚焦显微镜技术观察LC3B聚集,用Western blo
【机 构】
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温州医科大学附属第二医院 麻醉科,浙江 温州,325027
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目的:探讨促炎症消退介质maresin-1(MaR1)对巨噬细胞自噬的影响及其机制.方法:培养小鼠骨髓来源巨噬细胞,给予MaR1后,用激光扫描共聚焦显微镜技术观察LC3B聚集,用Western blot法测定LC3B与LC3A比值,用qPCR法测定ATG5、ATG7、BECN-1基因表达.用溶酶体抑制剂氯喹(CQ)、PI3K抑制剂(LY294002)、雷帕霉素、ALX抑制剂Boc-2分别预处理细胞后,测定beclin-1表达和LC3B与LC3A比值的变化.取p50-/-和WT小鼠,提取骨髓巨噬细胞,给予MaR1刺激,测定LC3B与LC3A比值的变化,及p50、p65的表达.结果:流式细胞仪测定结果显示F4/80和CD16的共表达达90%以上.巨噬细胞经MaR1作用后,LC3B的荧光强度明显增强,LC3B与LC3A的比值上升(P<0.05),ATG5、ATG7、BECN-1基因表达量增高(P<0.01).经CQ或雷帕霉素预处理后,MaR1仍旧使巨噬细胞自噬增强.而加入LY294002预处理后,MaR1促进自噬的作用消失.经MaR1作用,巨噬细胞的p50表达量增多(P<0.01),且在p50-/-小鼠提取的巨噬细胞上,MaR1促进自噬的作用消失.结论:MaR1通过ALX/NF-kB通路促进骨髓来源的巨噬细胞的自噬.
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