广藿香MSAP分析技术体系的优化及引物筛选

来源 :广东药学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jemi0926
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目的首次利用甲基化敏感扩增多态性(MSAP)技术开展广藿香表观遗传多样性研究,建立并优化广藿香MSAP技术分析的反应体系。方法对MSAP技术中关键的步骤,包括酶切反应中的酶切时间和基因组DNA酶切量.预扩增反应中连接产物的稀释倍数、选择性扩增中预扩增产物的稀释倍数等条件进行了优化。同时,利用优化的条件,对81对引物进行初步的多态性筛选。结果分步酶切,以1000ngDNA量进行EcoR Ⅰ(30U)酶切5h,纯化反应产物,再各取15此的EcoR Ⅰ酶切纯化产物进行Msp Ⅰ/HapⅡ(10U)酶切5h,可完
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