目的 探讨敲低Abl相互作用蛋白1(Abl interactor 1,ABI-1)对胃癌NCI-N87细胞体外增殖和迁移能力的影响.方法 利用脂质体和嘌呤霉素筛选稳定表达ABI-1短发夹RNA(short hairpin RNA,ShRNA)的NCI-N87模型细胞,用实时定量RT-PCR和Western blot鉴定ABI-1敲低的效果;用CCK-8试剂盒、细胞骨架染色和Transwell小室检测ABI-1敲低对细胞增殖、形态和骨架以及迁移的影响;用Western blot检测磷酸化AKT蛋白的表达.结果 成功获得表达ABI-1-ShRNA的NCI-N87细胞模型.CCK-8法检测显示NCI-N87-Vector和NCI-N87细胞在36 h和48 h的增殖率之间相比差异均无统计学意义(t=0.400、0.489,P＞0.05),而NCI-N87-ABI-1-ShRNA在36 h和48 h这2个时间点的增殖率均低于NCI-N87细胞(t=2.85、4.166,P＜0.05),ABI-1敲低抑制NCI-N87细胞的增殖.细胞骨架染色显示ABI-1敲低能够改变90%NCI-N87细胞的形态和骨架结构.Transwell研究显示NCI-N87、NCI-N87-Vector和NCI-N87-ABI-1-ShRNA的细胞迁移数分别是66±8、65±8和30±4,前两者相比差异无统计学意义(t=0.269,P＞0.05),敲低组与NCI-N87相比差异有统计学意义(t=9.550,P＜0.05),ABI-1敲低抑制NCI-N87细胞的迁移.Western Blot显示ABI-1敲低抑制磷酸化AKT蛋白的表达.结论 ABI-1敲低可能通过PI3K/AKT通路抑制胃癌细胞NCI-N87的体外增殖和迁移。
敲低Abl相互作用蛋白1的表达抑制胃癌细胞NCI-N87的体外增殖和迁移
【摘 要】
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目的 探讨敲低Abl相互作用蛋白1(Abl interactor 1,ABI-1)对胃癌NCI-N87细胞体外增殖和迁移能力的影响.方法 利用脂质体和嘌呤霉素筛选稳定表达ABI-1短发夹RNA(short hairpin RNA,ShRNA)的NCI-N87模型细胞,用实时定量RT-PCR和Western blot鉴定ABI-1敲低的效果;用CCK-8试剂盒、细胞骨架染色和Transwell小室检
【机 构】
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100044,北京大学人民医院临床分子生物学研究所,100044,北京大学人民医院临床分子生物学研究所,100044,北京大学人民医院临床分子生物学研究所,100044,北京大学人民医院临床分子生物学
【出 处】
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中华普通外科杂志
【发表日期】
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2011年26期
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