shRNA介导IL-1β基因沉默对大鼠脊髓损伤的保护作用

来源 :中华显微外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:akufar
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目的

观察IL-1β基因RNA干扰腺病毒载体对大鼠脊髓损伤(SCI)后运动功能恢复的影响,并探讨其可能机制。

方法

将48只健康雄性SD大鼠用压迫损伤法制成大鼠SCI模型,随机分为4组:正常对照组(Sham组)、脊髓损伤组(Vehicle组)、空载体组(Ad-GFP组)和IL-1β shRNA腺病毒组(Ad-shIL-1β组)。采用BBB评分评估大鼠后肢运动功能情况;荧光显微镜下观察GFP表达情况;ELISA法测定脊髓组织中IL-1β、TNF-α和IL-6蛋白表达水平;免疫荧光染色显示脊髓组织中NeuN阳性细胞的表达。

结果

SCI后1 d,可观察到Ad-GFP组和Ad-shIL-1β组大鼠损伤部位脊髓组织有GFP表达;SCI后7 d、14 d和21 d,Ad-shIL-1β组BBB评分(分别为8.17 ± 1.17、10.17 ± 0.98、11.33 ± 0.82)明显高于Vehicle组(分别为4.00 ± 0.89、5.67 ± 1.03、6.17 ± 1.17)和Ad-GFP组(分别为3.83 ± 0.98、5.33 ± 1.21、5.67 ± 1.03)(P<0.05)。SCI后21 d,Ad-shIL-1β组(115.17 ± 25.77)的NeuN阳性细胞较Vehicle组(52.50 ± 20.87)和Ad-GFP组(51.50 ± 15.10)明显增加(P<0.05);SCI后1 d,Ad-shIL-1β组IL-1β、TNF-α和IL-6蛋白表达(分别为138.83 ± 7.96、143.38 ± 10.20和120.43 ± 9.79)较Vehicle组(分别为169.33 ± 11.45、172.33 ± 8.26、163.00 ± 9.57)和Ad-GFP组(分别为172.83 ± 10.85、167.48 ± 8.19、159.48 ± 10.98)明显降低(P<0.05)。

结论

IL-1β表达水平降低能明显提高SCI后运动功能的恢复,对SCI具有保护作用。

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