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目的 明确庆大霉素高水平耐药肠球菌(HLGR)新氨基糖苷类耐药基因及其传播机制.方法采用琼脂筛选法筛选获得HLGR,用琼脂稀释法及K-B纸片法进行抗菌药物的药敏试验,并通过聚合酶链反应(PCR)、质粒提取、Southern杂交、酶切克隆测序对耐药基因及其传播机制进行研究. 结果肠球菌可通过产新的质粒介导的氨基糖苷类耐药基因aph(2")-Ie编码的修饰酶APH(2")-Ie引起HLGR.酶切克隆测序显示aph(2")-Ie与染色体介导的aph(2")-Id有较高的氨基酸同源性,其上游存在编码转座酶TnpA的插入序列,下游存在编码链霉素腺苷转移酶(str)基因.Southern杂交证实该耐药基因位于16 kb左右的质粒上.结论 HLGR可由一种新的质粒介导的APH(2")-Ie的氨基糖苷类修饰酶引起,并可通过转座酶与其他耐药基因一起在质粒或染色体之间进行传播。