【摘 要】
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将重组人酸性蛋白水解酶原(rh-proBACE)基因克隆到原核表达载体pET28a质粒中,构建了pET28a-rh-proBACE重组表达载体,并在大肠杆菌菌株Rosetta中进行表达.包涵体中的表达产物
【基金项目】
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教育部科学技术研究项目，高等学校博士学科点专项科研项目
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将重组人酸性蛋白水解酶原(rh-proBACE)基因克隆到原核表达载体pET28a质粒中,构建了pET28a-rh-proBACE重组表达载体,并在大肠杆菌菌株Rosetta中进行表达.包涵体中的表达产物溶于6 mol/L盐酸胍,经Ni-Sepharose亲和层析纯化后,得到高纯度的rh-proBACE蛋白,将此蛋白在复性液中重新折叠后,于酸性条件(pH 4.5)下激活,切去酶原序列,产生有活性的rhBACE蛋白,并利用人工合成多肽底物(BAS-131)测定其活性.
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