正反义人乙酰肝素酶真核表达体系构建及其意义的研究

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目的:构建正反义人乙酰肝素酶(HPA)的肝癌细胞克隆表达体系,研究其对肝癌细胞转移潜能的影响。方法:建立正反义人HPA真核表达载体,脂质体法转染高转移人肝癌细胞系HCC-P,G418选择培养,以RT—PCR和免疫组织化学检测HPA mRNA及蛋白表达。细胞计数,MTT实验测定细胞生长状况。裸鼠尾静脉注射转染肿瘤细胞,30d后称肺脏质量,计数肺表面转移结节数,比较不同转染细胞的转移潜能。结果:限制性内切酶及测序证实载体构建成功;RT—PCR证实,转染正反义载体的细胞在HPA mRNA水平上相差10.13倍;
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