研究端粒酶抑制因子X1(PinX1)对食管癌细胞放射敏感性及活性氧(ROS)水平的影响。
方法食管癌细胞分为对照组(未做细胞转染)、照射组(8 Gy X射线)、PinX1组(转染pDsRed1-PinX1至过表达)、照射＋PinX1(转染pDsRed1-PinX1至过表达后8 Gy X射线照射)。MTT测定细胞增殖，流式细胞术测定细胞凋亡，Western blot测定细胞中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Caspase-9)的活化水平，二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯(DCFH-DA)法测定细胞中ROS水平，集落形成实验测定放射敏感性。构建EC9706细胞致裸鼠皮下移植瘤模型，每组20只，小鼠每4天接受5次8 Gy剂量的γ射线局部照射，分析异种移植小鼠模型中PinX1过表达与放射敏感性的关系。
结果与对照组相比，照射组和PinX1组细胞的存活率从100%降低至(67.92±4.71)%和(83.14±4.01)%，差异有统计学意义(t＝9.433、4.957，P<0.05)，细胞凋亡率从(6.47±1.46)%升高到(44.38±4.16)%和(25.42±2.78)%，差异有统计学意义(t＝12.882、6.439，P<0.05)，细胞中Caspase-3活化水平升高(t＝6.655、2.531，P<0.05)，Caspase-9的活化水平升高(t＝3.775、3.088，P<0.05)，细胞内ROS水平升高(t＝12.110、7.339，P<0.05)。与照射组相比，照射＋PinX1组细胞存活率从(67.92±4.71)%下降至(52.73±5.58)%，差异有统计学意义(t＝8.942，P<0.05)，细胞凋亡率从(44.38±4.16)%升高至(55.29±4.98)%，差异有统计学意义(t＝3.707，P<0.05)，细胞中Caspase-3活化水平升高(t＝15.435，P<0.05)，Caspase-9的活化水平也升高，(t＝17.990，P<0.05)，ROS水平升高(t＝4.526，P<0.05)。过表达PinX1的EC9706细胞放射敏感性增加，增敏比为1.408。过表达PinX1的细胞裸鼠移植瘤体积明显减小。
结论PinX1抑制食管癌细胞增殖，诱导食管癌细胞凋亡，增加食管癌细胞放射敏感性。