【摘 要】
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[目的]通过检测目的基因的转录水平和表达强度,筛选来源于解淀粉芽孢杆菌内源启动子,确定适合碱性果胶酶基因表达的强启动子,并进一步对选用的强启动子进行分析。[方法]通过生物信息学手段对启动子片段进行预测与筛选,采用相对荧光强度、酶活力等表征手段进行分析,同时采用RT-qPCR技术检测不同启动子的转录水平。[结果]启动子PrapA、PmetE-1、Phin-1表达碱性果胶酶的活力分别是P43启动子的9
【机 构】
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天津科技大学生物工程学院工业发酵微生物教育部重点实验室
【基金项目】
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国家重点研发计划(2021YFC2104002);
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[目的]通过检测目的基因的转录水平和表达强度,筛选来源于解淀粉芽孢杆菌内源启动子,确定适合碱性果胶酶基因表达的强启动子,并进一步对选用的强启动子进行分析。[方法]通过生物信息学手段对启动子片段进行预测与筛选,采用相对荧光强度、酶活力等表征手段进行分析,同时采用RT-qPCR技术检测不同启动子的转录水平。[结果]启动子PrapA、PmetE-1、Phin-1表达碱性果胶酶的活力分别是P43启动子的9.8倍、4.8倍、3.0倍,筛选出的这三个强启动子为其他异源基因在解淀粉芽孢杆菌中的表达奠定了基础。[结论]通过生物信息学手段预测及筛选启动子,筛选得到比较强的启动子PrapA、PmetE-1、Phin-1有效提高了碱性果胶酶的表达量。
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