【摘 要】
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探讨白藜芦醇对单钠尿酸盐(monosodium urate,MSU)晶体诱导小鼠RAW264.7巨噬细胞的炎症因子、氧化应激指标及核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2-related factor
【机 构】
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湖北民族大学,风湿性疾病发生与干预湖北省重点实验室,湖北恩施445000;湖北民族大学附属民大医院,湖北恩施445000;天津益倍生物科技集团有限公司,天津300000
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探讨白藜芦醇对单钠尿酸盐(monosodium urate,MSU)晶体诱导小鼠RAW264.7巨噬细胞的炎症因子、氧化应激指标及核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2-related factor 2,Nrf2)/血红素氧合酶1(hemeoxygenase 1,HO-1)信号通路相关基因的作用机制,为急性痛风性关节炎(acute gouty arthritis,AGA)的治疗提供理论依据.使用不同浓度白藜芦醇作用于RAW264.7细胞5h后,再加入MSU刺激24 h.采用CCK-8法检测白藜芦醇对RAW264.7细胞增殖的作用;ELISA法检测细胞分泌肿瘤坏死因子α(tumour necrosis factor-α,TNF-α)水平;应用2',7'-二氯荧光素二乙酸酯(2',7'-dichlorodi-hydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)探针法检测细胞内活性氧自由基(reaction oxygen species,ROS);测定细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量;实时荧光定量PCR (real-time PCR)法检测Nrf2、Kelch样ECH相关蛋白1(Kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1)、醌氧化还原酶1[NAD(P)H quinine oxidoreductase 1,NQO1]和HO-1 mRNA的表达.结果 显示,白藜芦醇能够抑制RAW264.7细胞增殖;明显抑制MSU诱导RAW264.7细胞分泌的TNF-α水平;明显抑制MSU诱导RAW264.7细胞内的ROS、MDA表达,增加SOD表达;降低MSU诱导RAW264.7细胞内的Keap1 mRNA表达,增高Nrf2、NQO1和HO-1 mRNA的表达.综上,白藜芦醇能够抑制MSU诱导RAW264.7巨噬细胞产生的炎症反应,并通过调节Nrf2/HO-1信号通路提高巨噬细胞抗氧化能力.
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