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目的探讨人白细胞弹性蛋白酶(HLE)与其底物反应的最适条件,建立一种高通量的HLE抑制剂体外筛选模型。方法通过测定反应产物——对硝基苯胺(ρ—NA)的光密度值,研究电解质浓度、反应温度、反应体系pH值、酶和底物作用浓度、反应时间及检测波长等对酶促反应的影响程度,确定酶与底物反应的最佳条件。结果确定的最优反应条件为:HLE(O.2U/m1)30μ1,底物(50mmol/L)100μl,含1.0mol/LNaCl的Tris缓冲液(pH7.5),反应温度37℃,反应时间24h,检测波长为545nm。结论建立了一