甜菜叶片中Rubisco纯化及其多克隆抗体的制备

来源 :东北农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:rongtian2588
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通过(NH4)2SO4分级沉淀、凝胶层析和离子交换柱收集等步骤,优化甜菜叶片中Rubisco的提取、纯化方法,Rubisco纯化倍数达到7.7;经Native—PAGE显示为一条带,纯度达到90%以上,测定其全酶分子质量为540ku;SDS—PAGE显示为存在两个亚基,分子质量分别为50和14ku。通过免疫白兔,制备Rubisco的多克隆抗体,并经双向免疫扩散法检测,抗体效价超过1:32。可为今后Rubisco酶学特性的进一步研究及免疫电镜细胞学定位奠定基础。
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