补体3a受体第2胞外上174位硫化酪氨酸形成其配基结合位点

来源 :中国医学科学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：guomenling

【摘要】

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目的探讨酪氨酸硫化对补体第3成分片断a受体(C3aR)配基结合的意义.方法体外构建全长人野生型C3aR及其突变型的表达质粒,并测定开放读框序列.证实序列正确后,转染人肾胚胎上皮

【作者】

：

高金明

【机构】

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中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院呼吸科

【出处】

：

中国医学科学院学报

【发表日期】

：

2004年3期

【关键词】

：

补体3a G蛋白耦联受体酪氨酸硫化

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目的探讨酪氨酸硫化对补体第3成分片断a受体(C3aR)配基结合的意义.方法体外构建全长人野生型C3aR及其突变型的表达质粒,并测定开放读框序列.证实序列正确后,转染人肾胚胎上皮细胞(HEK)293T 24 h后用35S-蛋氨酸/半胱氨酸或35S-硫标记转染的HEK 293T细胞,48 h后再进行免疫沉降实验.转染的HEK 293T细胞在24h后分成两部分,一部分细胞转染后48 h用流式细胞仪检测受体的表达水平,另一部分用于碘-125标记配基结合实验.测定转染了C3aR及其突变体的犬胸腺上皮细胞(Cf2Th

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