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目的：采用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）测定24批夏枯草中16种酚类化合物的含量，并采用灰色关联分析和偏最小二乘回归分析方法探讨酚类化合物与抗氧化能力的相关性。方法：夏枯草样品用80%甲醇超声提取，并基于LC-MS/MS建立夏枯草中16种酚类化合物的含量测定方法，以Waters ACQUITY UPLC BEH C18（2.1mm×100 mm，1.7 μm）色谱柱为固定相，以0.1%甲酸-乙腈为流动相在体积流量为0.4 mL/min条件下进行梯度洗脱，负离子多反应监测模式检测。以DPPH自由基清除能力、ABTS+自由基清除能力和铁离子还原能力评价夏枯草的抗氧化活性。结果：16种酚类化合物在各自浓度范围内线性关系良好，相关系数r均大于0.99，精密度、重复性、稳定性和回收率良好。体外抗氧化实验证明夏枯草具有较强的清除ABTS+、DPPH自由基和铁离子还原能力，灰色关联分析和偏最小二乘回归分析结果表明迷迭香酸、咖啡酸、芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷对于抗氧化的贡献较大。结论：本研究建立了同时测定夏枯草中16种酚类化合物的LC-MS/MS方法，进一步通过相关性分析确定了夏枯草抗氧化的主要活性成分，从而为夏枯草产品的质量控制与开发利用提供科学依据。