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目的:构建人肝细胞生长因子(human hepatocyte growth factor ,hHGF)基因重组pCMV -G﹠NR-U6-hHGF慢病毒载体,并检测其在成肌干细胞系C2C12细胞中的hHGF表达,为治疗失神经喉肌纤维化的研究提供依据。方法采用RT -PCR法扩增并纯化得到hHGF基因片段,并将其克隆到 pCMV -G﹠ NR -U6上,再将重组慢病毒载体转化入感受态大肠杆菌DH5α,筛选阳性菌落并行BamHI和 HindⅢ双酶切鉴定。对筛选后的重组质粒阳性克隆行PCR鉴定和测序,将表达质粒