【摘 要】
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摘要：采用培养皿种子萌发法和盆栽法测定了湖南省境内长沙市、永州市、常德市、益阳市、浏阳市、岳阳市、娄底市7个市州10个地区油菜田看麦娘潜在抗药性种群对精喹禾灵的抗性水平，测定了常德市桃源地区看麦娘潜在抗药性种群以及敏感种群谷胱甘肽S转移酶（GSTs）对精喹禾灵的敏感性，对桃源地区看麦娘抗性品系及敏感品系ACCase基因片段进行扩增和测序，比较了两种生物型的基因序列。培养皿种子萌发法测定结果表明：常
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摘要：采用培养皿种子萌发法和盆栽法测定了湖南省境内长沙市、永州市、常德市、益阳市、浏阳市、岳阳市、娄底市7个市州10个地区油菜田看麦娘潜在抗药性种群对精喹禾灵的抗性水平，测定了常德市桃源地区看麦娘潜在抗药性种群以及敏感种群谷胱甘肽S转移酶（GSTs）对精喹禾灵的敏感性，对桃源地区看麦娘抗性品系及敏感品系ACCase基因片段进行扩增和测序，比较了两种生物型的基因序列。培养皿种子萌发法测定结果表明：常德市桃源地区看麦娘抗药性生物型对精喹禾灵的抗性水平最高，抗性倍数为10.50倍，其他地区看麦娘抗性倍数在2.01～7.09倍之间，抗性水平不明显；盆栽法测定结果表明：桃源地区看麦娘抗性倍数最高，为25.30倍，其他地区看麦娘抗性倍数在2.43～9.47倍之间，尚未产生明显抗药性。经精喹禾灵处理后，看麦娘抗药性生物型的GSTs活力在第5天明显高于敏感生物型，表明GSTs的活性是引起看麦娘对精喹禾灵抗性的重要因子。通过靶标基因片段扩增与DNA测序比对发现，抗药性生物型氨基酸序列第93位比敏感生物型多出一个丙氨酸，抗药性的产生与靶标基因的突变是否相关需要进行进一步验证。
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在直径9 cm的培养皿中进行剂量反应试验。看麦娘种子用质量分数为0.2%的硝酸钾（KNO3）于4 ℃冰箱中低温处理72 h后，继续用去离子水培养至露白，挑选长势一致的种子各40粒分别置于含有5 mL不同质量浓度药液和铺有两张滤纸的培养皿内，加盖确保种子处于湿润状态。精喹禾灵的有效成分含量分别为0.2、0.4、0.8、1.6、3.2、6.4 mg/L，以去离子水处理作为空白对照，每个处理重复4次。培养皿置于光照培养箱内培养，温度为白天24 ℃，晚上18 ℃，每天光照12 h。处理7 d后测量芽长，计算抑制率，求出回归方程。所有数据使用DPS软件处理。
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谷胱甘肽S转移酶（GSTs）是一类重要的解毒酶，它可以催化谷胱甘肽与多种疏水化合物的亲电子基团相连接，这种连接方式是生物体进行脱毒和排毒的重要方式[18]。研究结果显示，桃源地区看麦娘GSTs活力在第5天显著高于敏感品系看麦娘，表明其对精喹禾灵产生中等抗药性的原因之一为其代谢酶GSTs代谢能力的增强，这与其他相关禾本科杂草对ACCase抑制剂产生抗药性的研究结论基本一致[1920]。Li Lingxu[21]等研究发现，第1 781位异亮氨酸突变为亮氨酸是导致麦田罔草对精恶唑禾草灵产生抗药性的主要原因；Tang Huaiwu[22]等报道，日本看麦娘对高效氟吡甲禾灵产生抗药性主要可能是由4个核苷酸突变导致的，包括甘氨酸取代1 734位精氨酸，丝氨酸取代1 739位苏氨酸，亮氨酸取代1 738位蛋氨酸，以及天冬酰胺取代2 041位异亮氨酸；汤怀武[23]报道，抗性和敏感生物型日本看麦娘ACCase基因序列存在11处差异。本研究结果显示，抗药性生物型植株的氨基酸序列在第93位比敏感生物型多一个丙氨酸，但考虑到抗药性生物型与敏感生物型来自不同生态区，遗传背景可能不同，因此其氨基酸序列的突变是由于其遗传背景不同导致还是抗性水平差异造成仍需进行进一步验证。
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