论文部分内容阅读
目的：构建BNIP3-HA融合蛋白的真核表达载体，观察BNIP3在Hela细胞中表达及其定位。方法：采用两步克隆法将HA和BNIP3的编码序列以融合表达的形式克隆到载体pcDNA3上，随后转染Hela细胞。BNIP3经Alexa Fluor488免疫荧光标记，线粒体用MitoFluor Red589染色后在荧光显微镜下观察BNIP3的表达和定位。结果：重组质粒经酶切、聚合酶链反应（PCR）和测序鉴定构建正确，并在Hela细胞中能够表达，在荧光显微镜下观察，BNIP3-HA融合蛋白分布于线粒体。结论：成功构