【摘 要】
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目的评价自噬在氢减轻脓毒症小鼠肺损伤中的作用。方法清洁级健康雄性ICR小鼠60只,6周龄,体重20~25 g,采用随机数字表法分为5组(n=12):假手术组(Sh组)、脓毒症组(Sep组)、脓毒症+氢气组(Sep+H2组)、脓毒症+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤组(Sep+3-MA组)和脓毒症+3-甲基腺嘌呤组+氢气组(Sep+3-MA+H2组)。采用盲肠结扎穿孔法制备小鼠脓毒症模型,于术前1 h时腹腔
【机 构】
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300052 天津医科大学总医院麻醉科 天津市麻醉学研究所,300052 天津医科大学总医院保健医疗部,300052 天津医科大学总医院麻醉科 天津市麻醉学研究所,300052 天津医科大学总医院麻醉
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目的评价自噬在氢减轻脓毒症小鼠肺损伤中的作用。
方法清洁级健康雄性ICR小鼠60只,6周龄,体重20~25 g,采用随机数字表法分为5组(n=12):假手术组(Sh组)、脓毒症组(Sep组)、脓毒症+氢气组(Sep+H2组)、脓毒症+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤组(Sep+3-MA组)和脓毒症+3-甲基腺嘌呤组+氢气组(Sep+3-MA+H2组)。采用盲肠结扎穿孔法制备小鼠脓毒症模型,于术前1 h时腹腔注射3-甲基腺嘌呤10 mg/kg,吸入氢气给药方案:术后1和6 h时分别吸入2%氢气1 h。术后24 h时采集动脉血样,测定PaO2,计算氧合指数,取肺组织,进行病理学评分;分离线粒体,采用Clark氧电极法测呼吸控制率(RCR),采用荧光分光光度法检测线粒体膜电位(MMP),采用萤光素-萤光酶发光法检测线粒体ATP含量;采用Western blot法测定自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达,计算LC3-Ⅱ与LC3-Ⅰ表达的比值(LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ)。
结果与Sh组比较,Sep组和Sep+H2组肺组织病理学评分升高,氧合指数、肺组织线粒体RCR、MMP和ATP含量降低,肺组织LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ升高(P<0.05);与Sep组比较,Sep+H2组肺组织病理学评分降低,氧合指数、肺组织线粒体RCR、MMP和ATP含量升高,肺组织LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ升高,SEP+3-MA组肺组织病理学评分升高,氧合指数、肺组织线粒体RCR、MMP和ATP含量降低,肺组织LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ降低(P<0.05),Sep+3-MA+H2组各指标差异无统计学意义(P>0.05);与Sep+H2组比较,SEP+3-MA+H2组肺组织病理学评分升高,氧合指数、肺组织RCR、MMP和ATP含量降低,肺组织LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ降低(P<0.05)。
结论氢减轻脓毒症小鼠肺损伤的机制与增强肺组织自噬水平有关。
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