脾切除断流术中出血洗涤红细胞自体回输对照研究

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  【摘要】 目的:探讨脾切除断流术中出血洗涤红细胞自体回输与库存异体同型红细胞成分输血对机体血液系统的影响,探索理想的术中输血方法。方法:随机对照观察脾切除断流术中出血洗涤红细胞回输组(对照组)与输库存异体同型红细胞组(观察组),两组之间成分输血24 h后外周静脉血红细胞、血小板、总胆红素及凝血酶原时间的变化,进行统计学处理。结果:观察组成分输血24 h后红细胞、血小板较对照组高,其凝血酶原时间较对照组低,比较差异均有明显的统计学意义(P<0.001)。观察组总胆红素较对照组轻度升高,比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:术中出血洗涤红细胞自体回输较输库存洗涤红细胞效果好,有利于红细胞功能的恢复和机体凝血功能改善。
  【关键词】 脾断流术; 出血; 洗涤红细胞; 输血; 对照研究
  为了解决肝硬化脾功能亢进患者术中出血与输血的难题,尤其是稀有血型输血困难的问题,本院从2009年1月-2013年6月择期行脾切除加断流术治疗肝硬化门脉高压症食管胃底静脉曲张、脾功能亢进患者60例,采用随机对照的方法观察术中出血洗涤红细胞回输与术中输库存红细胞治疗的效果,现报告如下。
  1 资料与方法
  1.3 方法
  1.3.1 观察组 全身麻醉,行常规腹腔镜脾切除加胃贲门周围血管离断术/开腹脾切除加胃贲门周围血管离断术,手术切口区粘贴无菌贴膜袋收集经过切口的出血。手术过程中使用北京京精医疗设备有限公司生产的“自体-3000P型血液回收机”机器离心转速为5600 r/min,最小过滤层网孔径为40 μm,回收后血球压积在45%~65%,游离血红蛋白和肝素清除率均大于97%。抗凝药使用肝素盐水(生理盐水500 ml加肝素25 000 U),手术开始前连接储血过滤器、血液回收罐及一次性灭菌管道,将手术室负压吸引与储血罐连接,负压控制在20 kPa以内,使过滤器产生负压,术前30 min或手术时间超过3 h常规预防性使用抗生素。术中使用肝素溶液100 ml预冲回收系统,吸引收集100 ml血液,滴注10~15 ml肝素溶液,按10:1~1.5比例,结合术中出血速度、患者凝血功能用微量泵调节肝素滴注速度。吸引器吸引收集手术野的出血、渗血及纱垫、纱布挤出的血。术中出血全部回收至储血器内备处理,回收的血液经储存、净化、排空,回收到储血袋内,按照收集一处理一回输的程序,在术中进行自体血洗涤红细胞回输,输血前10 min静脉滴注地塞米松磷酸钠10 mg。术中发生腹腔镜下不能控制的出血时,立即改中转开腹手术,收集手术中全部腹腔出血,采用上述方法实施腹腔血洗涤红细胞回输。成分输血24 h后,采集外周静脉血化验红细胞、血小板、总胆红素、凝血酶原时间。
  1.3.2 对照组 吸引器负压吸引收集:(1)手术野的出血、渗血;(2)纱垫、纱布挤出的血;(3)脾脏切除后脾血窦内的出血,估计术中出血量,按照出血200 ml输注1 U红细胞计算补充丢失的红细胞。输库存红细胞24 h后,采集外周静脉血化验红细胞、血小板、总胆红素、凝血酶原时间,使用与观察组相同的方法进行统计学处理。
  1.4 统计学处理 采用SPSS 13.0软件对所得数据进行统计分析,计量资料以(x±s)表示,比较采用t检验,计数资料采用 字2检验,以P<0.05为差异有统计学意义。
  3 讨论
  肝硬化门脉高压症并食管胃底静脉曲张破裂大出血是常见危及生命的急诊,患者常并发脾功能能亢进、肝功能损害及凝血功能的异常表现,急症手术风险大,死亡率较高。为了提高手术的安全性,减少术中出血导致自体血源的浪费,本研究观察组收集手术中未被污染的出血,通过红细胞洗涤处理后进行自体回输,与对照组输库存洗涤红细胞进行对比观察发现:观察组术后24 h外周静脉血红细胞、血小板较对照组高,其凝血酶原时间较对照组缩短,比较差异均有明显的统计学意义(P<0.001)。观察组回输自体洗涤红细胞前30 min静脉滴注地塞米松磷酸钠10 mg,利用了糖皮质激素能抗炎性介质、抗过敏、抗休克、稳定细胞膜及溶酶体膜的作用,减轻红细胞的水肿,使其形态逐渐恢复双面圆盘状,提高流动过程中抗剪切力和变形能力;自体输血无排异性,输血温度接近人体的体温,对机体内环境干扰小,有利于红细胞、血小板和凝血因子生理功能的恢复;以上因素可能是观察组术后24 h外周静脉血红细胞、血小板较对照组升高,其凝血功能得到改善的原因。结合本研究体会,术中出血洗涤红细胞回输具有以下优点:(1)应激反应刺激自体骨髓造血干细胞的分化,提高机体的造血能力;(2)避免了同种异体输血后异体抗体的产生;(3)减少了受血者因输异体血而发生的特异性和非特异性免疫抑制反应;(4)降低了输血相关性急性肺损伤的发生率;(5)避免了异体输血可能发生的经血传播性疾病。因可能存在胃肠壁浆膜挫伤、管道接口、空气、腹水等无法预测因素,术前及术中预防性使用抗生素能有效预防术中可能的血污染。因经反复洗涤处理后回输的红细胞均是健康年轻的红细胞,细胞碎片、胆红素及90%肝素经洗涤废液排出,对机体的凝血功能干扰较小。所以,术中回输洗涤红细胞对机体的凝血功能干扰较小,吸引术中出血时应控制负压在20 kPa以内,减少因负压吸引导致红细胞在回收管道内快速流动碰撞损伤因素,因使用肝素抗凝过量,其多余的肝素可以用鱼精蛋白对抗。
  异体输血白细胞抗体学说;受血或供血者白细胞抗体与循环血液中的白细胞抗原结合,通过补体介导激活白细胞、中性粒细胞,导致肺毛细血管内皮损伤、渗漏、肺损伤。自体血洗涤红细胞经过了过滤、反复洗涤过程,清除了破碎的红细胞、白细胞、脂肪细胞、血小板、血浆及其中的凝血因子,回输成分是单纯的红细胞。如果能将手术中收集的全血送中心血站通过精细处理,实现自体红细胞、血浆、冷沉淀成分回输,使有限的自体血能够得到最好的利用,一定能缓解部分血源紧缺问题。新鲜出血在吸引管道与抗凝剂肝素钠混匀,避免了创面可凝血形成血凝块,提高了术中出血的回收质量。自体血回输的方式有预存式、稀释式、回收式三种,回收式自体血回输又分为术中自体血回收和术后引流血回收两种[1],肝移植手术采用供肝者术前预存式采血备血,选择一对一供肝者给受肝者提供血源,有可能会减少肝移植围手术期,因输不同配型异体血导致的免疫排斥反应。腹腔镜脾切除断流术操作精细,深部显露清楚,术中超声刀、Ligasure的使用能达到良好的止血效果。但是,在肝脏功能较差、术中渗血多的情况下,因门静脉压力较高,静脉壁较薄,腹腔镜下止血比较困难,应立即中转开腹止血尽快完成手术,术中出血经红细胞洗涤处理后自体回输,避免术中大量出血进一步加重肝功能损害,导致严重凝血异常而危及患者的生命。本研究开腹脾切除33例,其中3例为腹腔镜中转开腹病例,由于及时中转手术,术中采取了腹腔出血自体回输技术,有效地保障了手术安全性。腹腔自体血回输技术能及时补充手术中丢失的红细胞,应对血源紧缺的困境。脾血流入腹腔的时间最好不超过6 h,以免因凝血因子大量丢失,引起凝血功能障碍,导致继发性纤溶状态,出现创面渗血[2]。大量输入洗涤过的红细胞可能造成凝血功能障碍,一般认为回收量大于2000 ml时,可以仅补充血浆和白蛋白,超过3000 ml时应该补充新鲜冰冻血浆和血小板[3]。洗涤后的红细胞悬液经过同位素标记,检验这些红细胞生活能力正常,与库血相比具有更强的抗渗透压细胞溶解[4]。同时回收的红细胞2,3-DPG含量及携氧能力正常[5]。本研究观察组总胆红素较对照组轻度升高,比较差异有统计学意义(P<0.05),可能与术中负压吸引时的铲刮和湍流,不可避免地导致一定程度的红细胞机械性溶血有关,因此,通常建议最大负压设置不超过150 torr[6]。输500 ml贮存血液后24 h之内,约10%的红细胞出现溶血现象,释放出7.5 g血红蛋白,产生250 g胆红素[7]。红细胞携氧能力下降,出现低体温,代谢障碍和凝血缺陷,全血贮存超过24 h,基本不存在具有活性的血小板、凝血因子V和Ⅷ,库存血时间愈长,以上变化愈显著。大量输入库血,可引起严重的凝血障碍、枸橼酸盐中毒、高血钾、低血钙甚至心律失常[8]。回收血液并不会使循环血液内的血小板激活,循环血中凝血酶原片段F1+2水平升高,可能激活凝血系统。肝硬化患者凝血功能较差,选择术中自体出血洗涤红细胞回输较输库存红细胞对纠正贫血,改善凝血功能方面具有优势。自体血回输过程中可影响红细胞体积和变形能力,维持储血器内红细胞外硫酸镁浓度5~10 mmol/L,可减轻红细胞损伤[9]。在术中回收血中可以检测到高浓度的补体C3a、 C5b-9 及炎性因子TNF-a、IL-1、IL-6、IL-8[10]。朱文献等[11]研究显示,手术输血后IL-6,IL-8在两组患者都有变化,以腹腔自体洗涤红细胞回输组(研究组)增高变化最为显著,同种异体红细胞成分输血(对照组)IL-6、IL-8没有明显升高甚至有所降低,提示异体输血免疫功能受到一定程度的抑制,输血相关性急性肺损伤的发生率较自体输血高。回收血使用生理盐水洗涤后,K+、Mg2+、Ca2+浓度均不足正常生理水平的50%,存在高Na+、高Cl-,低K+,由于细胞膜Na+泵、Ca2+泵运转异常,造成细胞内Na+升高,Ca2+超载,经过血液回收机洗涤的红细胞呈肿胀状态,红细胞的变形性降低,可能影响微循环灌注和氧的转运[12]。研究者认为:人体血红蛋白>80 g%,红细胞压积>0.23,组织器官不会缺氧,体内部分凝血因子能维持正常值的30%就能维持正常的凝血功能[13]。肝硬化,肝脏体积明显缩小,肝功能明显异常时,一定要及时纠正凝血异常,临床工作中会遇到肝硬化患者因手术中出血过多,大量反复输库血,最终导致手术创面大量渗血,手术无法止血的困境。推广术中自体出血回输技术,尽可能减少异体输血导致的并发症,尚有待今后长期循证医学证据的研究探讨。   参考文献
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  (收稿日期:2013-04-09) (本文编辑:欧丽)
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