【摘 要】
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原癌基因c-Myc是诱导多能干细胞(iPSC)生产中重要的转录因子之一。水牛c-Myc的克隆和表达,可以为下一步研究其功能和使用特异性转录因子生产水牛iPSC奠定基础。采用RT-PCR扩
【机 构】
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广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室;
【基金项目】
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国家“863”重大专项(2011AA100607);国家自然科学基金资助项目(31360287);广西回国基金项目(2013GXNS-FCB019001);广西大学科研基金项目(XBZ120572)
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原癌基因c-Myc是诱导多能干细胞(iPSC)生产中重要的转录因子之一。水牛c-Myc的克隆和表达,可以为下一步研究其功能和使用特异性转录因子生产水牛iPSC奠定基础。采用RT-PCR扩增水牛c-Myc编码区(CDS),RT-PCR和免疫荧光技术检测内源c-Myc在水牛胎儿成纤维细胞(BFF)和胃上皮细胞(BSEC)中的表达情况;构建表达c-Myc的逆转录病毒载体(pMX-c-Myc),病毒法转入BFF中,免疫荧光技术分析外源c-Myc在BFF中的表达情况。结果表明:c-Myc在水牛BFF和BSEC中都有表达;水牛c-Myc的CDS全长1 320 bp,氨基酸序列与牛、猪、人和鼠相应蛋白的同源性分别为98%、96%、91%和86%,与小鼠c-Myc蛋白的结构相似;逆转录病毒载体介导的c-Myc能在BFF中表达。
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