【摘 要】
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目的 探讨锌指蛋白Zpr1对前脂肪细胞分化及胰岛素信号通路的影响及潜在的分子机制。方法 采用60% kcal高脂饲料喂养8周龄C57BL/6J雄性小鼠16周建立高脂饮食诱导胰岛素抵抗小鼠模型（IR模型组，n=7），以常规饲料喂养小鼠为对照组（n=7）。采用葡萄糖耐量及胰岛素耐量实验，检测各组小鼠血糖值，验证诱导组小鼠胰岛素抵抗表型。采用Western blotting及Real-time PCR检
【基金项目】
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国家自然科学基金（81800711）； 陕西省卫生健康科研基金项目（2018D004）；
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目的 探讨锌指蛋白Zpr1对前脂肪细胞分化及胰岛素信号通路的影响及潜在的分子机制。方法 采用60% kcal高脂饲料喂养8周龄C57BL/6J雄性小鼠16周建立高脂饮食诱导胰岛素抵抗小鼠模型（IR模型组，n=7），以常规饲料喂养小鼠为对照组（n=7）。采用葡萄糖耐量及胰岛素耐量实验，检测各组小鼠血糖值，验证诱导组小鼠胰岛素抵抗表型。采用Western blotting及Real-time PCR检测高脂饮食诱导胰岛素抵抗小鼠及常规饮食组小鼠皮下及内脏脂肪组织中Zpr1蛋白及mRNA表达的变化。采用生物信息学预测联合双荧光素酶报告基因系统检测ZPR1的单核苷酸多态性（SNP）rs964184位点分别出现GG基因型和CC基因型时对miR-4286识别结合ZPR1 3’UTR的影响。小鼠前脂肪细胞3T3-L1转染miR-4286模拟物后，观察miR-4286调控Zpr1表达对脂肪细胞分化及胰岛素信号通路的影响。结果 与对照组小鼠比较，IR模型组小鼠皮下及内脏脂肪组织中Zpr1蛋白及mRNA表达水平明显降低（P＜0.05），且内脏脂肪组织中更明显（P＜0.01）。ZPR1的rs964184 SNP位点导致ZPR1 3’UTR不易形成多重发卡结构，可促进miR-4286识别并结合于ZPR1 3’UTR。IR模型组小鼠皮下及内脏脂肪组织中miR-4286水平明显升高，且内脏脂肪组织中更明显（P＜0.05）。小鼠前脂肪细胞3T3-L1中Zpr1蛋白的表达水平受miR-4286模拟物调控降低（P＜0.05）；且转染miR-4286模拟物后，3T3-L1细胞中脂肪细胞分化及胰岛素信号通路相关蛋白Ppar-γ、Perilipin A、pAkt、IRS-1表达水平明显降低（P＜0.05）。结论 GG型rs964184位点可促进miR-4286对Zpr1的转录后调控，Zpr1的低表达可抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化及胰岛素信号通路。
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