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从甘蓝型油菜湘油15号基因组中分离总DNA,以此为模板进行多聚酶链式反应(PCR).PCR产物与克隆载体pGEM-T Easy连接,经NotI酶切后插入pBluescriptIISK+.序列测定表明,PCR产物为654bp的DNA片段,fad2基因片段只朝pBluescriptIISK+的T3-T7方向插入,经BamHI和SacI酶切后插入表达载体质粒pBI121相同的酶切位点,构建反义fad2表达载体.